产品目录

毛发的主要成分是角化蛋白，可以抵抗自然界中大多数的酶和化学物质，不易分解，正是因为毛发物证的不易破坏性、形态稳定性，毛发物证对于案件侦破具有关键作用。毛发分毛根、毛干、毛尖三部分。毛根含有染色体DNA，但自然脱落的毛发根部含染色体DNA量极少。毛干部分含有线粒体DNA，随着近年来测序技术的发展，通过毛干线粒体检测更加准确。目前市场上专门用于毛发样品DNA纯化的产品很少，为此百奥莱博公司开发了本试剂盒。

• 将30～50mg左右头发充分剪碎成芝麻大小，将剪碎后样本转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中。
  
  • 最好从靠近根部的地方剪取样品。
• 加入1mL毛发DNA提取溶液A、50μL还原剂和20μL蛋白酶K溶液(10mg/mL)，37℃保温10小时（一般过夜保温就可以）。
  
  • 最好让反应体系处于摇晃状态，此保温长度一般可以让毛发溶化。
• 加入0.5mL的毛发DNA提取溶液B，振荡器上振荡30秒充分混匀。
  
• 12000rpm室温离心5分钟，小心将上清转移到新的2mL塑料离心管中。
  
• 在上清液中加入等体积的毛发DNA提取溶液C，上下颠倒30秒充分混匀。
  
• 将混合液分两次转移到离心吸附柱中。每次是先将0.7～0.8mL混合液转移到离心吸附柱中，室温放置2分钟，12000rpm室温1分钟，弃穿透液。再把剩余的一半上柱，重复此操作。
  
• 将0.7mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中，12000rpm室温离心半分钟，弃穿透液。
  
• 空甩离心吸附柱半分钟去除残留液体。
  
• 将离心吸附柱放置在一新的1.5mL塑料离心管中，加入0.2mL DNA洗脱液。
  
• 12000rpm离心1分钟，管底即为毛发DNA溶液。
  
• 在0.2mL含有cccDNA的毛发DNA溶液中，加入0.6mL cccDNA纯化溶液A，充分吹打或振荡2分钟。
  
• 加入0.2mL cccDNA纯化溶液B，振荡1分钟。
  
• 室温14000rpm离心3分钟，小心将上清液（约0.6mL）转移到新的塑料离心管中。
  
• 在离心管中加入等体积（0.6mL）cccDNA纯化溶液C，充分颠倒混匀。
  
• 室温14000rpm离心15分钟，小心弃上清，不要吸走管底微量的沉淀。
  
• 加入1mL自备的75%乙醇后，立即室温14000rpm离心1分钟，小心弃上清，不要吸走管底微量的沉淀
  
• 将离心管再次14000rpm离心半分钟，小心吸走残留的液体（约50～100μL）。
  
• 加入10～100μL超纯水或TE缓冲液，轻柔吹打溶解后可以立即用于后续实验。长期放置需要放-20℃。